【蝴蝶兰的种苗长什么样】蝴蝶兰组培苗生产技术蝴蝶兰组织培养技术

蝴蝶兰组培苗生产技术蝴蝶兰组织培养技术

1蝴蝶兰组织培养技术

1.1无菌苗种接受蝴蝶兰花茎为外植体，不仅容易获得，而且容易诱导，不会损害植物。侧芽饱满、新鲜、没有病毒的蝴蝶，选择茎进行修剪。切花茎的时候，为了防止微生物感染，要注意消毒刀刃。去除要去除的花梗，去除花，先用自来水冲洗，用洗涤剂浸泡5 ~ 7分钟左右，最后用自来水反复冲洗，放在超净工作台上进行表面灭菌。首先要把花茎切成3厘米左右，在75%酒精上冲洗5分钟，无菌水冲洗3次，用2%次氯酸钠冲洗20 ~ 30分钟，最后用无菌水冲洗2 ~ 3次，在整个消毒过程中，继续摇晃容器，使其均匀消毒。消毒后将发芽的茎接种于诱导培养基1/2MS6-BA3 ~ 5MG/L胰腺蛋白质0.5 ~ 1G/L椰子油150 ~ 200ML/L甘蔗20 ~ 25G/L阵地5.5 ~ 7G/L。培养20天后，侧芽萌发，长出2片叶子后，将它切开，直接世代增殖或诱导远近。

1.2原球茎诱导将无菌苗叶切成小块，MS6-BA4 ~ 6MG/L NAA 1 ~ 2MG/L胰蛋白石0.5 ~ 1G/L椰子油150 ~ 200ML/L甘蔗20 ~ 25G/L阵地5 .如果继续培养，可以看到表面突出球体，当部分表面细胞分化为根毛时，将原来的球根切成小块，从继代培养基中继承。

1.3大增殖受花梗侧芽诱导的不定芽或远近花为培养基MS6-BA2 ~ 5MG/L NAA 0.5 ~ 1.5MG/L胰蛋白石0.5 ~ 1G/L椰子油200 ml/L甘蔗20 ~ 25G/L琼脂5.5原球根培养通常在2个月后发芽，3个月后长成2 ~ 3叶树苗。幼苗培养2个月后，平均每株长4片叶子，2 ~ 3根，如果植物长得结实，就能转移到根培养中。

1.4根培育最多可将3 ~ 4厘米的苗接种根培器1/2毫秒NAA 0 . 5 ~ 1毫克/L椰200毫尔/L甘蔗20 ~ 25克/L阵地5 . 5 ~ 7克/L活性炭1 ~ 2克/L，培养30天

1.5培养条件蝴蝶兰组织培养温度26 2，光照强度1 500 ~ 2 000LX，每天光照10 ~ 12小时，培养基pH调整为5.4 ~ 5.7。

2瓶树苗运动和移植

移植前，先将无菌苗子移出配料室，放在通风良好、明亮的上温室里精炼树苗。1 ~ 2个月后，幼苗长了2 ~ 4根粗大的根，就可以移植了。移植前3天去除瓶盖，每天早上、中、晚上各浇一次水，以确保充足的湿度。3天后，用镊子将幼苗从培养瓶中轻轻取出，洗净根培养器，用1500倍的多菌灵药液浸泡3 ~ 5分钟，然后移植到疏松的苔藓、树皮、椰子壳等基质中，环境温度保持在25 ~ 28，空气湿度为85%，防止阳光直射。在此过程中，根据基质的保水情况浇水、喷雾，定期预防病虫害。

3组织培养中常见的问题及解决办法

3.1微生物污染细菌、真菌污染是组培生产中最常见的问题，也是影响蝴蝶兰组培苗生产成本的重要指标之一。细菌污染表明，培养材料附近出现粘液等物体、混浊的物资气味或气泡的发酵床，或材料附近的培养器出现混浊和运输无常的痕迹。真菌污染显示污染部分有不同的真菌，颜色有黑色、白色、黄色等。细菌污染一般与接种材料、工具和操作过程有关，真菌污染与环境有关。因此，在组织培养过程中，中外植体应选择保菌较少的幼部位，采取多次灭菌和替代灭菌方法，防止外植体保菌。控制接种室、培养室、培养基、接种机构灭菌条件，确保灭菌质量，经营者严格遵守无菌操作程序。随时观察树苗的生长情况，及时清除污染培养病。

3.2玻璃化植物组织培养过程中，叶片和淡尖透明或半透明的水浸型培养物称为玻璃化苗，这是组织培养苗的一种生理障碍症状。玻璃化不仅大大降低了组培苗的有效增殖系数，严重影响试管苗的质量，而且造成人、钱、物的巨大浪费。蝴蝶卵组培过程中出现玻璃化苗往往是由于过度使用生长调节剂引起的，通过降低培养基中细胞分裂素浓度、提高琼脂浓度、调节培养温度等避免的方法，可能会发生玻璃化流透视。在没有生长调节剂的培养基中，经过2 ~ 3代恢复培养，大多数透视都会恢复正常。

3.3褐化是蝴蝶兰组织培养中最常见的问题，主要表现为培养材料向培养期释放褐色物质，使培养期变成褐色，培养材料也慢慢变成褐色而死亡。常用的褐化控制方法包括在培养基中添加抑制褐化剂、控制培养条件等。抑制棕色剂主要分为活性炭、柠檬酸、聚乙烯吡咯(PVP)等吸附剂和维生素C、曲龙减肽等抗氧化剂两大类。生产中经常使用活性炭和PVP。可以进行液体培养，也可以在培养初期黑暗或弱光条件下保持较低的温度(15 ~ 20)，减少褐色变化。